Infekce kočičím herpesvirem je často pozorována v domácích chovatelských stanicích.
Nové kočky by měly být v karanténě po dobu prvních 3 týdnů a kočky by měly být izolovány, pokud je známo, že pocházejí ze stejné chovatelské stanice.
Virus
Kočičí herpesvirus (FHV), původce kočičí virové rinotracheitidy, je distribuován po celém světě. Virus patří do řádu Herpesvirales, čeledi Herpesviridae, podčeledi Alphaherpesvirinae, rodu Varicellovirus. Ačkoli byl popsán pouze jeden sérotyp, virulence se může mezi různými kmeny lišit; Rozdíly lze také pozorovat analýzou restrikčními enzymy.
Genom dvouřetězcové DNA viru FHV se nachází v ikosaedrické kapsidě obklopené proteinovým obalem a fosfolipidy, které obsahují alespoň 10 glykoproteinů. U koček se FHV replikuje v epiteliálních buňkách jak ve spojivce, tak v horních cestách dýchacích a v neuronech. Infekce neuronů umožňuje viru zůstat životaschopný po dlouhou dobu po primární infekci. FHV je antigenně příbuzný psímu herpesviru a skutečným herpesvirům 1 a 2; není znám žádný křížový přenos mezi druhy.
Virus je inaktivován během 3 hodin při 37 °C a je citlivý na většinu komerčních dezinfekčních prostředků, antiseptik a detergentů. Při 4 °C zůstává životaschopný asi 5 měsíců, při 25 °C měsíc a je inaktivován při 56 °C během 4-5 minut.
Epidemiologie
Kočka domácí je primárním hostitelem FHV, ale byla izolována i od jiných kočkovitých šelem, včetně gepardů a lvů, a protilátky proti ní byly zjištěny u pum. Neexistují žádné důkazy o infekci člověka.
Latentní chronická infekce je typickým výsledkem akutní infekce a periodická reaktivace způsobuje uvolňování viru s nosní, orální a spojivkovou sekrecí. S výjimkou školek není kontaminace životního prostředí pro přenos viru důležitá. Vylučování viru akutně infikovanými kočkami, stejně jako latentně infikované kočky vykazující reaktivaci, jsou dva hlavní zdroje infekce.
Transplacentární infekce není v terénu pozorována. Latentně infikované samice mohou přenášet FHV na své potomky po porodu, protože porod a laktace jsou stresující, což vede k reaktivaci viru a vylučování. Koťata mohou také získat infekci FHV v raném věku, před očkováním. Výsledek infekce závisí na mateřských protilátkách: v přítomnosti vysokého titru protilátek jsou koťata chráněna před onemocněním, což prokazuje subklinickou infekci, která vede ke zpoždění replikace viru, zatímco při absenci dostatečného množství mateřských protilátek se mohou rozvinout klinické projevy.
V malých populacích zdravých zvířat může být přítomnost vylučování viru méně než 1 % případů, zatímco ve velkých populacích, zejména těch s klinickými příznaky, může virus vylučovat až 20 % koček. V útulcích je riziko vyšší: pokud se 4 % koček dostanou do útulku s virem, do týdne může virus vylučovat 50 % koček. Nízká počáteční prevalence pravděpodobně odráží přerušovanou povahu vylučování viru během období latence.
Patogeneze
Virus se do těla dostává nosní, ústní dutinou nebo spojivkou. Způsobuje lytickou infekci epitelu nosní dutiny s rozšířením do spojivkového vaku, hltanu, průdušnice, průdušek a průdušinek. Léze jsou charakterizovány multifokální epiteliální nekrózou s infiltrací neutrofilních granulocytů a zánětem. Přechodná virémie spojená s mononukleárními buňkami se vyskytuje po přirozené infekci u mladých koček. To je také pozorováno u novorozenců.
Vylučování viru začíná 24 hodin po infekci a trvá 1-3 týdny. Akutní onemocnění odezní během 10-14 dnů. U některých zvířat se mohou vyvinout chronické léze v horních dýchacích cestách a očích.
Po infekci se virus šíří senzorickými nervy a dostává se do neuronů, zejména v ganglion trigeminu, který je hlavním místem latentní existence viru. Téměř všechny kočky, které vykazují primární infekci, se stávají přenašeči a infekci vylučují po dlouhou dobu. Neexistují žádné přímé diagnostické metody pro identifikaci latentní infekce, protože virus přetrvává jako genomová DNA v jádrech latentně infikovaných neuronů bez replikace. U přibližně 70 % latentně infikovaných koček lze pomocí léčby glukokortikoidy experimentálně vyvolat vylučování viru. Mezi další reaktivační stresové faktory patří laktace (40 %) a uvedení kočky do nového prostředí (18 %).
Některé dospělé kočky vykazují akutní léze během reaktivace viru; Onemocnění po reaktivaci se nazývá relaps.
Konjunktivitida může být spojena s vředy rohovky, které se mohou vyvinout v chronickou sekvestraci. Stromální keratitida je sekundární, imunitně zprostředkovaná reakce způsobená přítomností viru v epitelu nebo stromatu. Poškození nosních skořepin při akutním onemocnění je pravděpodobně predisponujícím faktorem pro rozvoj chronické rýmy.
Pasivní imunita získaná kolostrálními protilátkami
Během prvních týdnů života jsou koťata chráněna před infekčními chorobami mateřskými protilátkami, ale při infekci kočičím herpesvirem jsou hladiny protilátek obvykle nízké. Mohou přetrvávat po dobu 10 týdnů, ale mohou vymizet do 6 týdnů věku (asi u 25 % koťat)
Aktivní imunitní odpověď
Glykoproteiny uložené v membráně herpesviru jsou důležité pro navození imunity; Po infekci koreluje detekce protilátek neutralizujících virus (VNA) s detekcí glykoproteinů FHV. Kromě toho imunizace králíků membránovými proteiny FHV vedla k vysokým titrům VNA.
Přirozená kočičí herpesvirová infekce nevytváří úplnou imunitu; Imunitní odpověď obecně chrání před onemocněním, ale ne před infekcí; Po reinfekci byly mírné klinické příznaky pozorovány pouze po dobu 150 dnů po primární infekci.
Titry VNA po přirozené infekci jsou často nízké a pomalu se zvyšují – ve skutečnosti mohou chybět i po 40 dnech. VNA s největší pravděpodobností přispívají k ochraně před akutní infekcí. Byly prokázány další mechanismy zprostředkované protilátkami, např. protilátkou zprostředkovaná buněčná cytotoxicita (ADCC) a protilátkou zprostředkovaná lýza. Stejně jako u jiných infekcí alfaherpesvirem hraje důležitou roli v ochraně buněčná imunita, protože nepřítomnost sérových protilátek u očkovaných koček neznamená, že se u koček vyvine onemocnění; Na druhé straně sérokonverze nekoreluje s ochranou proti virulentním kmenům FHV.
Přestože přítomnost protilátek a ochrana proti rozvoji klinických příznaků spolu korelují, v současné době nejsou k dispozici žádné testy, které by indikovaly stupeň ochrany u jednotlivé kočky. Protože FHV je patogen respiračního traktu, jsou důležité slizniční a humorální odpovědi. Studie s intranazálními vakcínami prokázaly klinický přínos již 2-6 dnů po očkování.
Metody detekce kočičí herpesvirové infekce
Preferovanou metodou pro detekci FHV ve vzorcích tkání je PCR, ačkoli izolace viru se v současné době používá v několika laboratořích. Senzitivita a specificita těchto testů, zejména PCR, se mezi laboratořemi liší kvůli nedostatečné standardizaci.
PCR testy, které se v současnosti používají k detekci FHV DNA ve výtěrech spojivky, rohovky nebo nosohltanu, seškrabech rohovky, komorové vodě, sekvestracích rohovky, krvi nebo bioptických vzorcích zahrnují konvenční PCR, vnořenou PCR a PCR v reálném čase. Většina PCR primerů je založena na dobře konzervovaném genu thymidinkinázy.
Molekulární diagnostické metody jsou citlivější než izolace viru nebo nepřímá imunofluorescence (EBM třída I).
Protože PCR detekuje nepatrná množství virových nukleových kyselin, musí být pozitivní výsledky interpretovány opatrně – nemusí prokazovat žádnou souvislost s onemocněním. Citlivost PCR závisí na formátu testu; Systém by měl zahrnovat kontrolu měření kočičí DNA, aby bylo možné posoudit množství materiálu spotřebovaného v nátěru a kontrolovat inhibiční látky. Díky své vysoké citlivosti může PCR detekovat také DNA v seškrabech z rohovky a/nebo mandlí, což může indikovat neproduktivní infekci. Proto může být jeho diagnostická hodnota u klinické infekce špatná, v závislosti na citlivosti testu, testovaných vzorcích (biopsie a seškraby z rohovky jsou s větší pravděpodobností pozitivní než výtěry spojivek) a testované populaci (např. kočky z útulku jsou s větší pravděpodobností pozitivní než kočky domácí).
Kromě toho mohou testy PCR detekovat FHV DNA v modifikovaných živých virových vakcínách; Není známo, zda jsou vakcinační kmeny detekovatelné u nedávno očkovaných koček a jak dlouho po očkování.
Pozitivní výsledek PCR může ukazovat na nízké úrovně vylučování viru nebo latentní vylučování viru a neznamená, že virus je zodpovědný za pozorované klinické příznaky, i když naznačuje možnost opakování symptomů v budoucnu. Při použití PCR v reálném čase (EBM třída II) může naměřené množství viru poskytnout další informace o etiologické důležitosti agens: když je v nosním sekretu nebo slzách nalezeno velké množství viru, svědčí to o aktivní replikaci a zapojení viru do rozvoje klinických příznaků. Pokud je z rohovkového seškrabu izolováno malé množství viru, může to znamenat latentní infekci.
Při použití molekulární diagnostiky v klinické praxi je třeba se vyhnout použití fluoresceinu a lokálních anestetik, protože mohou narušit citlivost PCR. Pro stanovení podrobností o odběru a dodání vzorku je vhodné kontaktovat diagnostické laboratoře. Pomocí stejných vzorků umožňuje PCR současnou detekci dalších kočičích patogenů často se vyskytujících u respiračních a očních onemocnění, zejména Chlamydophila aureus a méně spolehlivě kočičího kaliciviru.
Izolace viru (VI) je alternativní metodou pro diagnostiku infekce FHV. Je méně citlivý než PCR, ale ukazuje, že existuje životaschopný virus, nejen virová DNA.
U koček s primární infekcí FHV lze virus detekovat izolací z výtěrů spojivek, nosu nebo hltanu nebo z posmrtných vzorků plicní tkáně. U chronických infekcí může být VI obtížná.
Asymptomatické nosiče FHV lze identifikovat pomocí VI, ale pozitivní i negativní prediktivní hodnoty VI jsou nízké. Vzorky by měly být odebrány před použitím fluoresceinu nebo barvení bengálskou růží, které inhibují replikaci viru v buněčné kultuře. Kromě toho musí být klinické vzorky rychle odeslány do laboratoře a během přepravy uchovávány v chladu. Z těchto logistických důvodů a přes dobrou citlivost na akutní onemocnění se VI rutinně nepoužívá k diagnostice infekce FHV.
FHV-specifický antigen lze detekovat imunofluorescenčním testem (IFA) v nátěrech spojivky nebo rohovky nebo z bioptických vzorků. Stejně jako u VI je třeba se před odběrem vzorků vyhnout použití fluoresceinu, protože může poskytnout falešně pozitivní výsledek a zkomplikovat interpretaci testu. IFA je méně citlivý test než VI nebo PCR, zejména u chronických infekcí. Nebyla pozorována žádná korelace mezi VI a IFA, ale kombinace obou metod může diagnostikovat přítomnost FHV lépe než kterýkoli test samostatně. IFA není pro svou nízkou citlivost a negativní vliv fluoresceinu, často využívaného v oftalmologické praxi, vhodným diagnostickým testem pro chronická oční onemocnění.
sérologie
Protilátky proti FHV lze detekovat neutralizačním testem nebo ELISA v séru, komorové vodě a mozkomíšním moku. Vzhledem k přirozené infekci a očkování je séroprevalence vysoká a průkaz specifických protilátek proto nekoreluje s onemocněním a aktivní infekcí (EBM třída I).
Navíc detekce protilátek neumožňuje rozlišení mezi infikovanými a očkovanými zvířaty, neutralizační protilátky jsou detekovány až 20-30 dní po primární infekci a titry mohou být nízké jak u akutních, tak u chronických zvířat. Proto má sérologie v diagnostice kočičí herpesvirové infekce omezenou hodnotu.
Klinické příznaky
Tabulka 1. Onemocnění FHV, léze a klinické příznaky
(Poznámka: Pro stanovení FHV jako etiologie chronické rinitidy je nutné vyloučit souběžnou infekci s jinými patogeny)
| Typ nemoci | Patologie | Klinické projevy |
|---|---|---|
| Klasické akutní onemocnění (cytolytické onemocnění) | Rýma, konjunktivitida, povrchové a hluboké vředy, zejména dendritické | Kýchání, výtok z nosu, překrvení spojivek a serózní výtok z očí |
